bjr tt le monde
pr ceux ki demandent les reaction de precipitation
le voila:
Les réactions de précipitation
.1. Généralités
- c'est une réaction qui apparaît dans un milieu liquide ou gélifié entre un antigène soluble et 1 anticorps
précipitant (Ig M, IgG).
- le précipité est dû à la formation d'un réseau macromoléculaire tridimensionnel
- l'anticorps doit être au moins bivalent (2 paratopes) : Fab ne donne pas de précipité ; seuls les sérums
polyclonaux donnent des réactions de précipitation.
- l'antigène doit être au moins bivalent (2 épitopes) : un haptène ne donne pas de réactions (un seul épitope) ;
mais si l'haptène est couplé à une protéine porteuse, ça marche.
2. Précipitation en milieu liquide : méthode de Heidelberger et Kendall (1929)
Cf. poly
- C'est la première technique ayant permis de quantifier une réponse en anticorps
- À partir de ces données expérimentales, on a déterminé une courbe de précipitation. Il en existe 2 types :
• courbe de type lapin : 3 zones :
zone 1 : excès d'anticorps. Les complexes immuns sont de petite taille. Il existe des
anticorps libre dans le surnageant.
zone 2 : zone d'équivalence. Tous les anticorps spécifiques sont complexés à l'antigène. Il
n'existe pas d'anticorps libres ou d'antigènes libres dans le surnageant.
Zone 3 : zone d'excès d'antigène. La taille des complexes immuns diminue et le précipité
se redissout. Il existe des antigènes libres dans le surnageant.
• courbe de type cheval : 3 zones + une prézone = prozone.
La prozone : dans les premiers tubes pas de précipité, car les anticorps ne sont pas précipitants. Cette prozone st due
à des anticorps très affins qui ne précipitent pas. Il se forme des complexes immuns solubles.
NB : la prozone est observable pour toutes les réactions antigène-anticorps. Il faut donc faire attention pour éviter les
faux négatifs.
3. immunonéphélémétrie et immunoturbidimétrie
- c'est une technique quantitative de dosage d'un Ag ou d'un Ac
- un des réactifs est à concentration constante : antigène constant pour un dosage d'anticorps et inversement.
- on obtient la concentration de la molécule à doser à partir d'une gamme d'étalonnage
- technique utilisable pour des molécules à des concentrations du mg/l.
Si la concentration d'anticorps correspond à celle d'antigène : apparition d'un trouble :
- turbidimétrie : mesure du rayonnement absorbé
- néphélémétrie : mesure du rayonnement diffusé (plus sensible).
4. Immuno-électrophorèse.
- technique qualitative en 2 temps.
- exemple : immuno-électrophorèse de protéines sériques
• 1er temps : séparation des protéines sous l'action du champ électrique. Les protéines sont séparées
selon leur charge et et leur PM
• 2ème temps : révélation des protéines séparées par immuno-diffusion avec un sérum animal
immunisé polyspécifique ou monospécifique.
Cf. schéma poly.
NB : application pour la recherche d'un déficit en anticorps.
saha ftourkoum
bn courage
09/09/09, 01:09 am
